Kit de l'anticorps de tuberculose bovin elisa
N ° de modèle: VD501E
ABBR.:BTB AB ELISA
Spécimen: sérum
Description
Spécification
Utilisation prévue: Le kit de détection ELISA de l'anticorps de tuberculose bovin est pour la détermination de la tuberculose bovine
Spécimen: sérum
Matériaux requis mais non fournis:
Procédures de test et interprétation
Étape 1Procédure de test
1.1 Préparation de la solution de lavage
Wconcentration en orgue wAshing Liquid:Avant utilisation, la solution de lavage doit être restaurée à température ambiante (20-25 degré) et secoué uniformément pour le rendre uniforme. Ensuite, dilué 20 fois la solution de lavage concentrée avec de l'eau purifiée (par exemple, une solution de lavage concentrée de 5 ml est ajoutée à 95 ml d'eau purifiée), bien mélanger, et le liquide de lavage dilué peut être stocké à 2-8 pendant 7 jours.
1.2 Préparation des échantillons
① Un sang animal entier a été prélevé, centrifugé à 4000 tr / min pendant 10 minutes et le surnageant a été collecté. Le sérum peut également être coagulé naturellement sans hémolyse.
② Diluer l'échantillon de sérum 1: 100 (ajouter un échantillon de sérum 2UL au diluant de l'échantillon 198ul) et bien mélanger.
Remarque: les contrôles négatifs et positifs n'ont pas besoin d'être dilués.
1.3 Préparation du conjugué enzymatique
Diluer le conjugué enzymatique 1: 200 (ajouter le conjugué enzymatique 5UL (X100) au diluant de l'échantillon 995ul) et bien mélanger.
1.4 Procédure de test
Préparez la microplaque d'étiquette enzymatique (selon le nombre d'échantillons, peut être démontée et utilisée plusieurs fois), ajouter 100ul du sérum dilué à la microplaque d'étiquette enzymatique, définir deux puits chacun pour les échantillons négatifs et positifs, et ajouter 100ul chacun pour négatif et des contrôles positifs à la réaction bien respectivement. Secouez doucement l'échantillon dans le puits, en utilisant le film de plaque d'étanchéité pour couvrir la plaque et incuber à 37 degrés pendant 30 minutes.
Opentez le film de plaque d'étanchéité, secouez la solution dans le puits de la plaque, ajoutez 300 µl de liquide de lavage de concentration de travail à chaque puits, puis jetez le liquide dans le puits. Répétez les étapes ci-dessus 5 fois et enfin se sécher sur un papier absorbant propre.
③Add 100 µl d'enzyme conjuguant à chaque puits, couvrir la plaque et incuber à 37 degrés pendant 45 minutes.
Opentez le film de plaque d'étanchéité, secouez la solution dans le puits de la plaque, ajoutez 300 µl de liquide de lavage de concentration de travail à chaque puits, puis jetez le liquide dans le puits. Répétez les étapes ci-dessus 5 fois et enfin se sécher sur un papier absorbant propre.
⑤Add 100 µl de solution de substrat à chaque puits, couvrir la plaque et incuber pendant 10 minutes à 37 degrés de la lumière.
⑥Add 50 µl Arrêtez une solution à chaque puits et déterminez le résultat dans les 5 minutes.
Étape 2 Interprétation des résultats
La valeur OD450 de chaque puits a été lue sur le lecteur de microplaques de puits 96-.
2.1 Validation
La valeur OD450 nm moyenne du contrôle négatif était<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 Méthode de calcul
Pour chaque échantillon, calculez le S / P comme suit en utilisant les valeurs d'échantillon et de contrôle corrigées:
2.3 Interprétation des résultats
Quand S / P<0.25, it is judged as negative.
Lorsque s / p supérieur ou égal à 0. 30, il est jugé positif.
Lorsque 0. 25 de moins ou égal à S / P<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
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